蛋白质糖基化表格-蛋白质糖基化的基本类型特征及生物学意义是什么?

蛋白质工程 10

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异源表达系统中蛋白质的糖基化对sds电泳有没有影响

1、电渗作用在支持物的电泳中,影响电泳的另一个重要因素是电渗作用。

2、不同蛋白质的SDS复合物 的短轴长度都不一样,约为18A,这样的蛋白质—SDS复合物,在凝胶中的迁移率,不 再受蛋白质原的电荷和形状的影响,而取决于分子量的大小,因而SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用于测定蛋白质的分子量。

蛋白质糖基化表格-蛋白质糖基化的基本类型特征及生物学意义是什么?
(图片来源网络,侵删)

3、电荷。氨基糖解离后,应带正电荷。但是,天然存在的氨基糖的氨基都被N-乙酰基取代,实际上相当于中性糖。许多糖链上有唾液酸,或糖醛酸,解离后带负电荷。所以,糖基化可能使蛋白质增加许多负电荷。

4、质谱技术(MS)包括MS联用广泛应用于蛋白质的纯度鉴定、分子量测定、序列测定、肽谱分析、二硫键测定、乙酰、糖基化等研究中,前景广阔。

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1、糖基化是在酶的控制下,蛋白质或脂质附加上糖类的过程,起始于内质网,结束于高尔基体。在糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的胺基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。

蛋白质糖基化表格-蛋白质糖基化的基本类型特征及生物学意义是什么?
(图片来源网络,侵删)

2、分类不同 糖蛋白糖链N连接型:N-糖链可分为复杂型、高甘露糖型和杂合型三类,它们的区别主要在外周链。糖蛋白糖链O连接型:糖蛋白糖链O连接型主要为O-糖苷键型。

3、CEA是癌胚抗原,Gold和Freedman首先从结肠癌和胚胎组织中提取。CEA是一种具有人类胚胎抗原特性的酸性糖蛋白。它存在于与内胚层细胞分化的癌细胞表面,是细胞膜的结构蛋白。

4、最初肽链合成是在核糖体,然后进入内质网进行折叠、n-糖链等修饰(糖蛋白大多是需要进入内质网进行修饰、折叠的),如果有o-糖链,则需要进入高尔基体。简单的说,需要核糖体、内质网和高尔基体。

糖链分析有哪些常规方法和步骤?

糖类的分析方法常规的有苯酚硫酸法、二硝基水杨酸法等化学方法,但是这些方法只能测定总还原糖,不能测定各种糖的含量,且比色定量不准确。

实验方法:质谱分析:质谱(MS)是确定蛋白质糖基化位点的黄金标准。通过对特定肽段的MS/MS分析,可以鉴定出糖基化的特定位点。免疫印迹:使用特定于糖基化位点的抗体进行检测。

高效液相色谱法(HPLC):这是一种广泛应用于化合物分离和鉴定的技术,特别适用于复杂混合物的分析。HPLC可以用于芸香苷中糖的精确鉴定,通过不同的色谱柱和检测器,可以实现高度特异性和灵敏度的分析。

电泳法即通过电泳的方法先得到糖蛋白条带或蛋白点,再通过电洗脱或透析的方法得到糖蛋白。此方法较为费时,且在操作中易使蛋白变性。而层析法则具有快速、准确、分辨率高、稳定性好等特点,是分析糖蛋白的理想手段。

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