基因工程通用-基因工程及其应用***讲解
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基因工程技术在应用中存在的问题有哪些
1、是缺乏产业化的接轨机制。国外的经验表明，高新技术只有通过资本市场的商业运作 才能加速它的产业化进程。 而国内很少有公司参与基因技术的研究与成果转化， 使基因成果 的研究与开发受到很大影响。
2、个人认为基因工程的主要弊端在于其应用到作物上之后带来的两大类问题，一个是食品安全问题，一个是环境安全问题。
3、基因工程育种的缺点是：可能会引起生态危机，技术难度大。 其原理：基因重组（或异源DNA重组）。 其方法：提取目的基因→装入载体→导入受体细胞→基因表达→筛选出符合要求的新品种。
4、基因工程可能引起广泛的生态环境安全性问题。基因工程对人体健康的威胁。可能引发基因污染转基因植物是人为地用基因工程技术将某种目标基因转入而获得的。
5、PCR技术的缺点是技术含量高，循环过程复杂，需要一定的器材。基因工程的优点是打破了常规育种难以突破的物种之问的界限，可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间，甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。
11,基因工程中载体需要具备哪些特点?12,密码子的基本性质
1、在宿主细胞内能独立***。（2）有选择性标记。（3）有一段多克隆位点。外源DNA插入其中不影响载体的***。（4）分子量小，拷贝数多。（5）容易从宿主细胞中分离纯化。
2、在宿主细胞中能保存下来并能大量***，且对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。
3、②容易进入宿主细胞，而且进入效率越高越好。③容易插入外来核酸片段，插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的***。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。每种酶的切位点只有一个。
4、载体一般具备三个特点：独立自主的***能力；具有可筛选的标记；容易转化和提取。
5、必须带有标记基因，以便筛选 4对受体细胞无害 5大小合适，便于操作 天然质粒并不完全具备上述条件，所以都要进行人工改造。
6、密码子具有通用性：不同的生物密码子基本相同，即共用一套密码子。
PCR克隆出来的基因怎么确定是我想要的
首先你得从基因库中找到这个基因，设计两端的引物，酶切，进行PCR扩增，然后跑胶，将条带与maker对照，判断酶切是否正确，然后挖胶回收就可重新得到这个基因了。谢谢。
第一步，通过PCR方法将目的基因已知的部分核苷酸序列扩增出来，进行放射性同位素标记（也可以用别的标记方法进行，如生物素、荧光素等），即用标记了放射性同位素的目的DNA片段作为探针，与扩增出来的DNA杂交。
按照你的目的基因设计引物，然后到cDNA文库中PCR扩增，能扩出东西说明文库中包含目的基因（引物特异性好的情况下），当然可以将所得片段测序进一步确认。
基因克隆的基本步骤流程如下：目的DNA片段的获得：DNA克隆的第一步是获得包含目的基因在内的一群DNA分子，这些DNA分子或来自于目的生物基因组DNA或来自目的细胞mRNA逆转录合成的双链 cDNA分子。
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