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筛选基因工程-基因工程中筛选目的基因的方法

基因工程 3周前 (04-27) 10

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1、利用特定抗体与目的基因表达产物特异性结合的作用进行筛选。此法不是直接筛选目的基因，而是通过与基因表达产物的反应指示含有目的基因的转化细胞，因而要求实验设计要使目的基因进入受体细胞后能够表达出其编码产物。

2、基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。

（图片来源网络，侵删）

3、要筛选出来。目的基因在细胞中表达没有错啊，是要把把含有目的基因的细胞筛选出来，这样比较好获得想要的细胞产物，不是把有目的基因的细胞中的基因取出来。

4、第一个问题：利用标记基因所体现的比如颜色、抗性等性状是否有表现，可以检测重组质粒是否进入受体细胞；然后顺便筛选，就是筛选出成功导入的细胞。

1、化学的和生物的方法。⑷克隆子的筛选和鉴定，带有目的基因的克隆子有没有组合到受体细胞的基因组中去，目的基因有没有在宿主细胞中通过转录、翻译表达出预先设计中想要得到的产物和表达产物如何分离、纯化等技术内容。

（图片来源网络，侵删）

2、其次通过对许多不同的生态型及大量限制性内切酶和杂交探针的分析，找出与目的基因距离最近的RFLP标记，通过染色体步移技术将位于这两个标记之间的基因片段克隆并分离出来。然后，根据基因功能互作原理鉴定目的基因。

3、重组子的筛选：从不同的重组DNA分子获得的转化子中鉴定出含有目的基因的转化子即阳性克隆的过程就是筛选。

4、我们实验室对天麻抗真菌蛋白基因作了功能克隆的研究（舒群芳等，1995；舒群芳等，19***），为了克隆植物基因也探讨了其它克隆方法，本文论述基因克隆的策略、方法及取得的一些进展。

5、基因克隆（gene cloning）或分子克隆，又称为重组DNA技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源的DNA分子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子，并使之在适当的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代DNA分子的过程。

1、然而，标记基因的妙用远不止于此。在基因工程的重组过程中，它们更是作为筛选***，与选择性标记如抗生素抗性基因联手。

2、而目的基因有可能插入标记基因上使标记基因不能正确表达，是在筛选的时候表达，所以要用选择性培养基筛选。并且在导入受体细胞之后标记基因就不再表达了。高中生物也没有详细说明是否整体整合到受体染色体上。

3、个体生物学水平的鉴定。如：一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后，是否具有了抗虫或抗病特性，需要做抗虫或抗病的接种实验，观察害虫的存活情况或植物的患病情况以确定是否具有抗性及抗性的程度。

4、mRNA充当的是信使的角色，DNA遗传信息的表达要靠它传递，基因导入目的基因后，只有mRNA发挥作用了，遗传信息才能真正表达出来，基因导入才算成功。

5、杂交育种实验：通过杂交，得到需要的性状后，需要筛选出纯合子。

CFU筛选法挑选的菌株，比其他筛选方法更加有效和准确。在CFU筛选中，细菌数目是通过数学公式计算出来的，适合处理菌体相对较小的情况，以提高筛选准确性。

利用标记基因的表达进行筛选。如果目的基因进入了工程菌，那标记基因就能表达，否则就不表达。表达不表达就是看是不是合成了相应的蛋白质或是不是产生了相应的性状。

标记基因、酶标记法。标记基因：是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用，是原核工程菌的筛选方法之一。酶标记法：是标记技术中的一种，是原核工程菌的筛选方法之一。

【答案】：直接选择法是针对载体携带某种或某些标志基因和目的基因而设计的筛选方法，其特点是直接测定基因表型。具体包括：①抗生素抗性筛选。

例如，通过基因工程培育抗虫棉时，就需要将抗虫的基因从某种生物（如苏云金芽孢杆菌）中提取出来，“放入”棉的细胞中，与棉细胞中的DNA结合起来，在棉中发挥作用。

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