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蛋白质组成测定-蛋白质的测定方法及优缺点

蛋白质工程 2周前 (04-29) 10

本篇文章给大家分享蛋白质组成测定，以及蛋白质的测定方法及优缺点对应的知识点，希望对各位有所帮助。

文章信息一览：

1、从凯氏定氮原理可以知道：凯氏定氮法是将含氮有机物转变为无机氮硫酸铵来进行检测，以得到含氮量的测定值乘以一定系数得出蛋白质含量。而含氮有机物不仅仅是蛋白质，还有三聚氰胺等等。

2、准备6个凯氏烧瓶，标号。3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g，浓硫酸0mL，30%过氧化氢0mL。

（图片来源网络，侵删）

3、凯氏定氮法测定出的含氮量，再乘以系数25，即为蛋白质含量。

1、【答案】：蛋白质一级结构测定的一般程序为：①测定蛋白质（要求纯度必须达到***%以上）的相对分子质量和它的氨基酸组成，推测所含氨基酸的大致数目。②测定多肽链N-末端和C-末端的氨基酸，从而确定蛋白质分子中多肽链的数目。

2、蛋白质的一级结构，就是肽链中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置。没有别的。蛋白质的一级结构也叫初级结构或基本结构。

（图片来源网络，侵删）

3、多肽链的分离。在测定一个蛋白质的结构以前，首先必须保证被测蛋白质的纯度，使结果准确可靠。其次要了解它的分子量和亚基数，按照其亚基数将蛋白质分成几个多肽链。肽链的拆开。

4、蛋白质的一级结构是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序，也是蛋白质最基本的结构。是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的。蛋白质一级结构是理解蛋白质结构、作用机制以及与其同源蛋白质生理功能的必要基础。

5、一级结构预测首先分析已纯化蛋白质的氨基酸残基组成。测定多肽链的氨基末端与羧基末端为何种氨基酸残基。把肽链水解为片段，分别进行分析。然后测定各肽链的氨基酸排列顺序，一般***用Edman降解法。

目前常用的蛋白质含量测定方法有：凯氏定氮法：通过测定样品中氮原子的含量来推算蛋白质的含量。由于蛋白质中氮原子的比例是恒定的，因此可以按照氮原子的比例计算蛋白质的含量。

凯氏定氮法检测的是粗蛋白，原理是检测其中的氮含量，因为氮含量在真蛋白中大约是16%左右，倒数就是25，所以，检测出氮含量后，乘以25就是粗蛋白含量了。

国家标准检测蛋白质含量的方法叫做凯氏定氮法，食物中的蛋白质在催化加热条件下分解，导致氨和硫酸结合产生硫酸铵。

是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，是分析有机化合物含氮量的常用方法。凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右。

蛋白质的检测原理：基于食品中蛋白质含量与食品中氮含量的比例关系换算的。如乳中蛋白质与氮含量的比值为38，大豆中蛋白质与氮含量的比值为71，普通食品中蛋白质与氮含量的比值为25。

Bradford法测定bai蛋白质浓度：实验原理。双缩脲法（duBiuret法）和zhiFolin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制dao，促使科学家们去寻找更好的蛋。

X射线晶体学可以通过测定蛋白质分子在晶体中电子密度的空间分布，在一定分辨率下解析蛋白质中所有原子的三维坐标。大约9%的已知蛋白结构是通过核磁共振技术来测定的。该技术还可用于测定蛋白质的二级结构。

本实验***用SDS-不连续垂直板型操作方法。通过实验使学生掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板式电泳的原理及技术，包括制胶、灌胶、加样、剥胶及固定染色等，学会用这些方法测定蛋白质分子量。

NMR技术后起之秀，相对于X-RAY较为简单，近年来技术越发成熟，可测定蛋白质的分子量也在攀升，而且其分辨率也很高，三维电镜重构技术也是结构生物学研究中的一种较新的技术。技术难点在于算法。

1、肌肉松弛。如果你没有摄入足够的蛋白质，身体只能分解肌肉以满足需要，就会导致肌肉松弛。此外，如果没有足够的蛋白质，身体在受伤后也需要更长的时间才能恢复，肌肉和关节疼痛也会加重。掉头发。

2、被称为必需氨基酸。动物蛋白中，一般都含有人体必需的8种氨基酸，特别是蛋制品和乳制品，故一般来说动物蛋白营养价值比植物蛋白高。正因为蛋白质有着如此重要的重要性及营养价值，蛋白质含量才成为食品检测中的重要指标。

3、现在我国检测蛋白质含量的方式为凯氏定氮法，就是检测其中含的氮的多少，而氮是蛋白质区别于其他营养物质的元素。一个三聚氰胺分子含有三个氮原子。在检测中可以提高氮元素的含量。

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