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蛋白质等电点测定结果-蛋白质等电点测定结果记录

蛋白质工程 2周前 (05-02) 9

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实验原理：通过测定酪蛋白在不同pH值下的溶解度，确定其等电点。在等电点时，酪蛋白的溶解度最低。实验步骤：将酪蛋***末溶解在不同pH值的缓冲液中，观察溶解情况并记录pH值。将pH值与溶解度作图，得到溶解曲线。

酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物，等电点为7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调到7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。

（图片来源网络，侵删）

酪蛋白等电点测定就是以醋酸和酪蛋白溶液中的醋酸钠构成各种不同pH值的缓冲液，在某种溶液中，酪蛋白溶解度最小时，该溶液的pH值就是酪蛋白的等电点，实验中，缓冲液的pH值必须准确，不然会造成误差，导致实验结果不准确。

近年来蛋白质的等电点可以***用等电聚焦技术加以准确测定，但需一定的实验条件。

酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白，对酸敏感，pH较低时会沉淀。影响酪蛋白等电点测定的因素是菌株的特性，酪蛋白是哺乳动物包括母牛，羊和人奶中的主要蛋白质，又称；干酪素、酪朊、乳酪素。

（图片来源网络，侵删）

在等电点pH附近，酪蛋白的氨基酸残基处于电中性状态。等电点的实际应用等电点是生物化学和生物技术领域中重要的概念之一，具有广泛的应用。在分离纯化蛋白质的过程中，可以利用酸碱性差异来实现蛋白质的分离。

1、胶粒直径约为20～800纳米，平均为100纳米。在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白会沉淀，加工后可制得干酪或干酪素。本实验利用加酸，当达到酪蛋白等电点ph=7时，酪蛋白沉淀。

2、蛋白质等电点测定实验目的如下：了解蛋白质的两性解离性质。学习测定蛋白质等电点的一种方法。加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。了解蛋白质变性与沉淀的关系。

3、用酪蛋白作为测定蛋白质的等电点是因为：酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白，对酸敏感，pH较低时会沉淀。用它来测定蛋白质的等电点可以时结果更加清晰明了。

4、不正确测定蛋白等电点时加入试剂后，要等它沉淀了才能进行观察，如果他没有沉淀的话，你的观察是无效的，而且在沉淀之前，你要做好观察的准备。

5、有关系。用醋酸与醋酸钠（醋酸钠混合在酪蛋白溶液中）配制各种不同pH值的缓冲液。向诸缓冲溶液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓冲液的pH值即为酪蛋白的等电点。

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