有机溶剂蛋白质沉淀-有机溶剂沉淀蛋白质的应用实例

蛋白质工程 8

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文章信息一览:

能使蛋白质沉淀的试剂

A.B.C都可以,起初是促进溶解,但是随着盐浓度的上升,上述三者都可以让蛋白析出为沉淀。

盐析是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和且水化膜被破 坏,导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。

有机溶剂蛋白质沉淀-有机溶剂沉淀蛋白质的应用实例
(图片来源网络,侵删)

能使蛋白质沉淀的试剂书:浓盐酸和浓氢氧化钠溶液会使蛋白质变性。蛋白质的沉淀剂有 加热,大部分蛋白质在温度超过60摄氏度以上会变性,沉淀。盐析法沉淀:硫酸铵分级盐析法,蛋白质疏水集团暴露,沉淀。

动物样品分析中常用于沉淀蛋白质的试剂是三氯乙酸。知识拓展 三氯乙酸,又名三氯醋酸,是一种有机化合物,化学式为C2HCl3O2,有***性气味,易潮解,溶于水、乙醇、乙醚。

有机溶剂法沉淀蛋白质通常要在较低温度下进行,其目的是什么?

蛋白质的沉淀方法中只有盐析法可以用于酶的制备过程。

有机溶剂蛋白质沉淀-有机溶剂沉淀蛋白质的应用实例
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代谢控制发酵技术:是指应用动态生物化学的知识和遗传学的理论选育微生物突变株,从DNA分子水平上,控制微生物的代谢途径,进行最合理的代谢,积累大量有用发酵产物的技术。

不同蛋白质盐析所需要的盐饱和度不同,所以可通过调节盐浓度将目的蛋白沉淀析出。被盐析沉淀下来的蛋白质仍保持其天然性质,并能再度溶解而不变性。 有机溶剂沉淀法 中性有机溶剂如乙醇、丙酮,它们的介电常数比水低。

乙醚用于去除之脂类物质,以纯化蛋白...随着温度的升高,酪蛋白胶囊之间 热碰撞频率增加,酪蛋白容易相互结合成块。

酶解法的优点是:可避兔某些药物在酸及高温下降解:对与蛋白质结合牢的药物(如保泰松、苯妥英纳),可显著改善回收率;可用有机溶剂直接提取酶解液而无乳化现象生成,当***用HPLC法检测时,无需再进行过多的净化操作。

三)蛋白质粗制品的获得 选用适当的方法将所要的蛋白质与其它杂蛋白分离开来。比较方便的有效方法是根据蛋白质溶解度的差异进行的分离。

有机溶剂沉淀蛋白质的原理

有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其与盐溶液一样具有脱水作用;其有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。

第一个是盐析现象,原因是水溶性蛋白质的表面电荷被中和,从而分子聚集沉淀。第二个是相似相容原理,水溶性蛋白当然不会溶于有机溶剂(如果溶剂比如酒精让蛋白质变性,那就是另外一回事了。

具体如下:盐析:向蛋白质溶液中加入高浓度中性盐破坏胶体的稳定性,中和蛋白质所带的电荷,又可以破坏水化膜。此法沉淀蛋白质一般不变性,可通过透析出去中性盐,仍保持生物学活性。

原理:蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出。蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀。由于水化层和双电层的存在,蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。

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