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基因工程反向筛选-基因工程反向筛选原理

基因工程 2周前 (05-06) 8

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1、鉴定植株纯合性，过表达株系可以直接验证，自交或拷贝数分析是常用手段，而基因编辑株系的检测则需要PCR扩增和测序，通过CRISPR/Cas系统解析突变类型（图12）。

2、检查方法：DNA分子杂交，检验是否导入了目的基因。分子杂交技术，检验是否转录出相应mRNA。抗原-抗体杂交技术，检验是否翻译出相应蛋白质。进行性状检验实验，检验是否表现出相应性状。

（图片来源网络，侵删）

3、最基本的是RT-PCR鉴定，看外源基因是否表达。高级一些的包括southern杂交，也是看表达。northern杂交，可以看拷贝数。还可以检测报告基因，如GUS染色，或者是看荧光，等等。

4、植物细胞经载体法间接或物化法直接转化后，大部分细胞是没有转化的，这就需要将这些未转化细胞与极少数转化细胞区别开来，淘汰未转化细胞，然后利用植物细胞的全能性在适宜的环境条件下，使转化细胞再生成可育的转基因植株。

5、对于抗虫性，可以先将植物种出来，取几片叶喂相应的虫，如果虫死则转基因成功。反之没成功。

（图片来源网络，侵删）

6、首次以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标，设计、筛选出特异性引物，优化实验参数，建立了转基因植物PCR定性检测方法体系，灵敏度达0。1﹪。

1、基因工程（geneticengineering），也叫基因操作、遗传工程，或重新组体DNA技术。

2、基因工程，又称为DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，运用分子生物学和微生物学为手段，将不同来源的基因按预先的设计，在细胞体外构建杂种DNA分子，然后导入受体细胞，以改变生物原有的遗传特性，获得人类所需要的新品种。

3、基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

、【基因工程的基本操作步骤】获取目的基因是实施基因工程的第一步。基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。

工业生产的各种发酵产品都是用微生物生产的，比如现在吃的好多抗生素、氨基酸、营养品，食品加工面包发酵，还有一些酸性饮料，柠檬酸、乳酸都是微生物。面包、酱油醋都是由微生物生产的。

基因工程的最终目的是获得目的基因的表达产物，即蛋白质（酶）。人们掌握基因操作的时间并不长，但已经获得了多种多样的表达产物。用基因工程改造过的微生物、动物、植物层出不穷，它们都被人为地赋予了特殊的使命。

关于基因工程反向筛选，以及基因工程反向筛选原理的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。