蛋白质的itraq定量分析-蛋白质定量方法及原理

蛋白质工程 10

今天给大家分享蛋白质的itraq定量分析,其中也会对蛋白质定量方法及原理的内容是什么进行解释。

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乙酰化位点定量原理?

1、免疫检测:使用特异性抗体来检测乙酰化蛋白。通过免疫沉淀、WB免疫印迹等方法,将目标蛋白从样品中富集出来,并使用抗体与乙酰化位点结合,然后用化学发光或荧光等技术进行检测。

蛋白质组学数据分析基础(一)

年代初期,各种技术已比较成熟,在这样的背景下,经过各国科学家的讨论,才提出蛋白质组这一概念。国际上蛋白质组研究进展十分迅速,不论基础理论还是技术方法,都在不断进步和完善。

蛋白质的itraq定量分析-蛋白质定量方法及原理
(图片来源网络,侵删)

因此,发展高通量、高灵敏度、高准确性的研究技术平台是现在乃至相当一段时间内蛋白质组学研究中的主要任务。

双向凝胶电泳技术及质谱基础的蛋白质组学研究程序为样品制备→等电聚焦→聚丙烯酰胺凝胶电泳→凝胶染色→挖取感兴趣的蛋白质点→胶内酶切→质谱分析确定肽指纹图谱或部分氨基酸序列→利用数据库确定蛋白。

DNA甲基化分析显示MSI肿瘤中全基因组CpG岛甲基化升高,并导致DNA修复途径的抑制。转录组学和蛋白质组学数据对体细胞拷贝数变化(SCNA)的综合分析显示,高CNV的肿瘤中反式作用最强的SCNA 集中在1q、3q、4q和20q染色体上。

蛋白质的itraq定量分析-蛋白质定量方法及原理
(图片来源网络,侵删)

蛋白质组学实验设计、质控与分析

凝胶电泳中蛋白质的着色不仅影响蛋白质分离的分辨率,同时也影响后续的质谱鉴定。蛋白质的染色可分为有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色四类。

蛋白质组学研究成功与否,很大程度上取决于其技术方法水平的高低。蛋白质研究技术远比基因技术复杂和困难。

但是它的缺点也很明显,操作复杂、肽段断裂效率低、价格昂贵等,这些缺点限制了它在蛋白质组学(Proteomics)中的广泛应用。

双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。

下面,我们就将就蛋白质组学的基本技术和这些领域的应用作一些介绍。

关于蛋白质的itraq定量分析,以及蛋白质定量方法及原理的相关信息分享结束,感谢你的耐心阅读,希望对你有所帮助。

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