蛋白质羰基化检测-蛋白质羰基化检测DNPH
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- 1、蛋白质检测方法
蛋白质检测方法
1、双缩脲法。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。
2、双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。
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3、比色法是测定蛋白质含量最常用的方法之一。原理是利用蛋白质与染色剂反应生成复合物,进而通过比色反应来测定蛋白质浓度。例如,布拉德福酸染色法Bradfordmethod和比二巴氏法BicinchoninicAcidmethod都是常用的比色法。
4、③Folin酚法(Lowry)Folin酚法是biuret 法的延伸,所用试剂由试剂甲和乙两部分组成。试剂甲相当于双缩脲试剂(碱性铜试剂),试剂乙中含有磷钼酸和磷钨酸。
5、测定蛋白质含量的方法有:凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法等。凯氏定氮法 凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。
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