蛋白质od值-蛋白质od值用什么仪器测
今天给大家分享蛋白质od值，其中也会对蛋白质od值用什么仪器测的内容是什么进行解释。
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western蛋白上样量计算
做western blot需要多少细胞并不是一个固定的值 这主要取决于蛋白的表达量，没有一个绝对的量 如果做细胞总蛋白的话，至少10的4次方细胞每微升蛋白裂解液。
收样前3min先配制细胞裂解液（现配现用），RIPA：蛋白酶抑制剂：磷酸酶抑制剂=99：1：1。6孔板收集蛋白每孔需200ul，计算用量。以收集六孔蛋白为例，按比例加入RIPA 1200ul，蛋白酶抑制剂12ul，磷酸酶抑制剂12ul，混匀后置于冰上。
这要根据你做的蛋白表达量多少，一般是用DAB显色要50-100μg，用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg，ecl法至少20pg。我也用组织作过western，蛋白浓度的确很高。
蛋白测定之后要加5X SDS上样缓冲液，该怎么加呢？是所有的标本一起加了，还是就算准备上样的量？经中心试验室CWW指点后才知道，可以一起加了。就是把蛋白样品的体积除以4就是了，这样的5Xbuffer就变为了1X。
内参一般是指待测样品中含有的一个表达水平稳定的蛋白质，而不是与待测样品相区分的另外一种样品。楼主所说的内参是否与其他的什么概念混淆了？如果给更具体的信息，我可以继续
如何测定样品中dna和蛋白质的含量
1、此法利用的是带苯环的氨基酸在碱性溶液中以偶氮染料显色，然后测定溶液中的吸光度，再与标准曲线对比，从而确定蛋白质的含量。双缩脲法 双缩脲法是一种用于测定蛋白质含量的经典方法。
2、蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。微量凯氏定氮法：含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。
3、由于磷钼酸与磷钨酸易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。而蛋白质中的酪氨酸和色氨酸均可发生此呈色反应。颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。故可用比色法测定蛋白质的含量。此法易受蛋白质样品中酚类化合物及柠檬酸的干扰。
4、nm 的形式，而且这种转变有一定的数量关系。一般情况，当溶液中的蛋白质浓度增加时，显色液在 595nm 处的吸光度基本能保持线性增加，因此可以用考马斯亮蓝 G-250 显色法来测定溶液中蛋白质的含量。
5、测定蛋白质相对含量的方法：直接测定UV法、双缩脲法（Biuret法）。直接测定UV法：这种方法是在280nm波长，直接测试蛋白。
关于蛋白质od值，以及蛋白质od值用什么仪器测的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。
